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在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，經(jīng)常少不了HEPES緩沖液。那么，HEPES緩沖液的配制和使用方法怎樣呢?HEPES緩沖液是一種弱勢(shì)，在開(kāi)放式的培養(yǎng)條件中，若加入HEPES，可防止培養(yǎng)基內(nèi)pH氧化升高，從而將PH維持在7.0左右。HEPES分子量為238.31，化學(xué)名：4-羥乙基哌嗪乙磺酸，分子式:C8H18N2O4S。HEPES常用于生物緩沖劑，pH值緩沖范圍：6.8-8.2，用在生化診斷試劑盒、DNA/RNA提取試劑盒及PCR診斷試劑盒里。對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性作用。它是一種氫離子緩沖劑，能較長(zhǎng)時(shí)間控制恒定的pH范圍。使用終濃度為10-50mmol/L。國(guó)內(nèi)AVT注射用HEPES已登記。備案登記號(hào)HEPES現(xiàn)貨供應(yīng)

生物緩沖劑在生物實(shí)驗(yàn)中會(huì)經(jīng)常被用到，它們種類繁多，可能你需要的緩沖劑和你選的緩沖劑表面符合，實(shí)際使用時(shí)就存在一定的差異，所以選好合適的緩沖劑是很有必要的；同時(shí)，不同緩沖液差別也很大。湖北新德晟帶你來(lái)聊聊Tris-HCl緩沖液與HEPES緩沖液的之間的區(qū)別。Tris-HCl緩沖液Tris緩沖液是在生物化學(xué)研究中使用較***的一種緩沖劑，其本身為弱堿，常用有效pH在“中性”范圍，Tris-HCl緩沖液：pH＝7.5～8.5；Tris-磷酸鹽緩沖液：pH＝5.0～9.0。Tris-HCl緩沖液優(yōu)點(diǎn)1、Tris-HCl緩沖液穩(wěn)定，與生理體液的相容性好（Tris-HCl與鈣、鎂離子不會(huì)形成沉淀；相反，磷酸鹽與鈣、鎂離子會(huì)產(chǎn)生沉淀）；2、而且相同PH，相同濃度的Tris-HCl緩沖液的離子強(qiáng)度低，這對(duì)酶類測(cè)定尤為重要，因?yàn)榇箅x子強(qiáng)度易致有些酶失活。因此，有時(shí)用Tris-HCl代替磷酸鹽緩沖液，效果更好。江蘇大批量HEPES實(shí)驗(yàn)室采購(gòu)國(guó)內(nèi)艾偉拓穩(wěn)定供貨注射級(jí)HEPES！

1MHEPES緩沖液用注射級(jí)水配制,經(jīng)過(guò)無(wú)菌過(guò)濾,其濃度為238.3g/L。HEPES是一種生物緩沖液,化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,對(duì)溫度和濃度變化不敏感。在pH7.2-7.6范圍內(nèi),較碳酸氫鈉緩沖液的緩沖能力更強(qiáng)。1.產(chǎn)品用途：常用的緩沖體系的一部分，可作為細(xì)胞培養(yǎng)基添加組分，維持pH恒定，推薦濃度為10-25nM。HEPES緩沖液在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中起什么作用？HEPES是一種弱酸，中文名字是羥乙基哌嗪乙硫磺酸，主要作用是防止培養(yǎng)基PH迅速變動(dòng)。在開(kāi)放式培養(yǎng)條件下，觀察細(xì)胞時(shí)，由于培養(yǎng)基脫離了5%二氧化碳的環(huán)境，培養(yǎng)液中的二氧化碳迅速逸出，導(dǎo)致PH值迅速升高。若培養(yǎng)液加了HEPES,就可以維持在PH7.0左右。一般在進(jìn)行克隆化培養(yǎng)時(shí)要添加HEPES.

儲(chǔ)存方法：HEPES緩沖液在2-8℃下可保存1年。注意事項(xiàng)：HEPES緩沖液運(yùn)輸時(shí)需要加冰袋。但儲(chǔ)存時(shí)避免冷凍，否則會(huì)有鹽類物質(zhì)析出。N-三(羥甲基)甲基甘氨酸Tricine，CAS是5704-04-1，是一種兩性離子緩沖液，名字由Tris和glycine衍生而來(lái)，結(jié)構(gòu)類似于Tris，但是高濃度具有比Tris更弱的抑制性，也是“Good”緩沖液之一，**初開(kāi)發(fā)用于提供葉綠體反應(yīng)的緩沖體系。Tricine的有效pH緩沖范圍為7.4-8.8，pKa=8.1（25℃），常用做電泳緩沖液，以及用來(lái)重懸細(xì)胞沉淀。Tricine具有低負(fù)電荷和高離子強(qiáng)度的特性，非常適用于電泳分離1~100kDa的低分子量蛋白?；谖灮鹣x(chóng)熒光素酶的ATP分析實(shí)驗(yàn)中，比較10種常見(jiàn)的緩沖液，Tricine（25mM）表現(xiàn)出比較好的檢測(cè)效果。另外，在自由基誘導(dǎo)的膜損傷實(shí)驗(yàn)中，Tricine還是一種有效的羥自由基清除劑。作者：泰安格林化工鏈接：GMP條件下生產(chǎn)艾偉拓注射級(jí)HEPES。

Tris-HCl緩沖液缺點(diǎn)：1、溫度效應(yīng)大，如4℃時(shí)pH=8.4，37℃時(shí)pH=7.42、pH值受溶液濃度影響較大，稀釋十倍，pH值的變化大于0.1；3、對(duì)某些pH電極發(fā)生一定的干擾作用，所以要使用與Tris溶液具有兼容性的電極。4、易吸收空氣中的CO2，所以配制的緩沖液要蓋嚴(yán)密封。HEPES緩沖液HEPES是一種非離子兩性緩沖液，其在pH7.2~7.4范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力，常用在生化診斷試劑盒、DNA/RNA提取試劑盒及PCR診斷試劑盒里。HEPES緩沖液優(yōu)點(diǎn)：pKa值介于6.0和8.0之間；在水中具有高溶解度；具有膜不透性，不易穿透生物膜；對(duì)生化反應(yīng)影響有限，可耐化學(xué)和酶解作用，且不與金屬離子生成復(fù)合物或沉淀；有極低的可見(jiàn)光和紫外光吸收；離子濃度、溶液組成和溫度對(duì)解離的影響小;HEPES緩沖液缺點(diǎn)：如果將HEPES水溶液暴露于環(huán)境光下三小時(shí)，會(huì)產(chǎn)生細(xì)胞毒性的H2O2；HEPES水溶液必須遠(yuǎn)離光線以免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果；而配置成溶劑后，要在4℃下保存，建議在短期內(nèi)使用效果更佳；HEPES粉末放置的時(shí)候一般放于干燥的室內(nèi)，不能直接長(zhǎng)時(shí)間照射陽(yáng)光。GMP條件下生產(chǎn)注射級(jí)HEPES。江蘇供注射用HEPES價(jià)格

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(1)hepes緩沖液可按所需的濃度直接加入到配制的培養(yǎng)液中,再過(guò)濾除菌.每1000ml培養(yǎng)液中加入2.38克HEPES,待溶后用lNNaOH調(diào)pH至7.2,濾過(guò)除菌后使用.此時(shí)HEPES的使用濃度為10mmol/L.(2)亦可配成100x貯存液（lmol/L），使用前取99ml培養(yǎng)液加入lml貯存液，**終應(yīng)用濃度仍為10mmol/L。lmol/L（100x）hepes緩沖液配制方法:取23.8gHEPES溶于90ml雙蒸水中,用lNNaOH調(diào)pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,過(guò)濾除菌,分裝小瓶（2ml/瓶）,4℃或-20℃保存.作者：知乎用戶0mmkBe備案登記號(hào)HEPES現(xiàn)貨供應(yīng)

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